Что Означает В Бактериологическом Анализе Рост Микрофлоры Не Выявлен

Бактериологический посев — один из видов лабораторного исследования, основанный на анализе биологического материала посредством его высева на специальные питательные среды. По результатам бакпосева выявляется наличие/отсутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов определенного типа с целью дальнейшего изучения их физико-химических свойств и определения схемы лечения диагностированных инфекционных заболеваний.

Ценность данного способа исследований заключается в том, что он позволяет не только обнаружить болезнетворные бактерии, но и установить степень их чувствительности к препаратам антибактериального действия. Иными словами, на основании анализа можно безошибочно подобрать комплекс медикаментозных средств для проведения успешной терапии.

Преимущества метода

Основными плюсами бактериологического посева можно назвать следующие:

• Высокая точность исследований. В отличие от ИФА (иммуноферментный анализ), ПЦР (полимеразная цепная реакция), вероятность получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов практически равна нулю.
• В качестве биологического материала возможно использование абсолютно любой жидкости, выделяемой из организма человека.
• Разработка атибиотикограммы. То есть, установление степени воздействия на выявленные микробы того или иного антибиотика, что позволяет проводить лечебные назначения с максимально высокой точностью.

Недостатки метода

К минусам бакпосева можно отнести такие факторы:

• Сложность выполнения процедуры и необходимость соблюдения специфических требований к забору материала.
• Длительность ожидания результат исследований.
• Наличие специальной лаборатории, а также соответствующей квалификации медперсонала, задействованного в проведении анализа.

Цель проведения бактериологического посева

Метод бакпосева достаточно распространен в медицинской практике, применяясь для диагностики заболеваний в самых разных областях медицины: хирургии, онкологии, гастроэнтерологии, отоларингологии и т. д. В гинекологии и урологии данный вид лабораторного анализа используется для исследования микрофлоры в целях диагностики следующих возбудителей:

• микоплазмоза и уреаплазмоза;
• трихомониаза;
• кандидоза (молочницы);
• хламидиоза.

По итогам исследования можно не только выявить наличие патогенных бактерий, но и определить их количественных состав. Что, в свою очередь, дает понимание того, на какой стадии прогрессирует болезнь, и скоординировать дальнейшее лечение.

Помимо мазка из половых органов для бакпосева используется также и ряд других разновидностей биологического материала. Например:

• Кровь — для проверки на стерильность, при внутрисосудистых инфекциях, эндокардите.
• Слизистая из носа, горла — для выявления вирусов и бактерий, провоцирующих риниты, синуситы, ангины и другие ЛОР-заболевания.
• Кал — для диагностирования дисбактериоза и прочих нарушений желудочно-кишечного тракта.
• Желчь — при наличии воспалительных заболеваний печени, поджелудочной железы, желчного пузыря.
• Мокроты — для определения инфекций дыхательных путей, в частности, туберкулеза легких.
• Слизистая глаз — при развитии гнойных воспалений глаз и других офтальмологических патологий.
• Кожный жир — для выявления стафилококков, грибков и прочих представителей патогенной флоры, скапливающихся в эпителиальном слое кожи лица.

Механизм проведения

Процедуру лабораторного исследования условно можно разделить на несколько этапов:

• Забор материала и помещение его на специальные питательные среды. Тип используемой среды зависит от цели проведения бакпосева (выращивание одного определенного возбудителя или расшифровка бактериальных культур с целью дальнейшего построения антибиотикограммы). При необходимости жидкие среды могут заменяться впоследствии на твердые поверхности, что позволяет проводить более точную идентификацию колоний бактерий.
• Помещение питательной среды в специальное оборудование (термостат), где создаются соответствующие условия для роста и размножения патогенных возбудителей. Имеют значение показатели влажности воздуха, температуры, освещения и т. д.
• Подкрашивание материала различными реагентами для лучшего осмотра и дальнейшего анализа. За счет красителей бактерии меняют свою расцветку и становятся более заметными на общем фоне питательной среды.
• Оценка выросших колоний по определенным показателям: плотность, форма, расцветка, химический состав и т. д.

Важно! Одним из важнейших условий проведения бактериологического посева является соблюдение абсолютной стерильности помещения лаборатории, а также используемой посуды и инструментов. Для переноса материала на среду применяются такие приспособления как стеклянная палочка, бактериальная петля, пастеровская пипетка.

В данном видео, на примере бактериологического анализа мочи, рассказывается о принципе проведения бакпосева.

Расшифровка бакпосева

Результат анализа оценивается по нескольким показателям, учитывающим не только качественный фактор (подтверждение наличия бактерий-возбудителей в среде), но и количественный — то есть, степень концентрации патогенных микроорганизмов в исследуемом материале. Для подсчета количества микробных клеток используется понятие колониеобразующей единицы (КОЕ), по которому можно определить уровень насыщенности бактериями изучаемого образца.

Выделяют 4 степени роста возбудителей:

• Первая — скудный рост бактерий на жидкой питательной среде и отсутствие роста на твердой среде. Такой результат не считается отклонением от нормы.
• Вторая — рост бактерий на твердой среде до 10 колоний. Свидетельствует не о наличии болезни, а скорее о загрязненности лабораторных принадлежностей для исследования.
• Третья — рост бактерий на твердой среде в пределах 10-100 колоний.
• Четвертая — более 100 колоний.

В заключении, выдаваемом на руки пациенту, результаты бакпосева обозначаются следующим образом:

• указывается название выявленного возбудителя на латинском языке (например, Trichomonas vaginalis — трихомонада);
• прописывается концентрация микроорганизма, выращенного в условиях питательной среды (норма — до 10 3 КОЕ/мл, ненорма — от 10 5 КОЕ/мл);
• указывается характер среды: флора условно-патогенна, патогенная.

Одновременно с определением концентрации бактерий производится анализ их чувствительности к антибиотикам. Наличие положительной реакции на тот или иной антибактериальный препарат обозначается символом «S», отрицательной — «R».

Правила проведения бакпосева на микрофлору у женщин

Перед сдачей анализа необходимо учесть ряд обязательных требований в части соблюдения правил личной гигиены, а также непосредственно механизма забора биологического материала. Заключаются они в следующем:

• за сутки до процедуры избегать половых контактов любого вида (анальный, оральный, вагинальный);
• не проводить спринцевания, ванночки, примочки на половые органы и прочие антисептические процедуры;
• отказаться от применения вагинальных свечей, таблеток;
• мазок должен браться не ранее, чем через 2 недели после менструации;
• за месяц до анализа исключить прием антибиотиков;
• не мочиться перед забором материала на протяжении 2-х часов.

Для исследования могут использоваться заборы из влагалища, мочеиспускательного канала, шейки матки, цервикального канала. Перед началом процедуры делается тщательная обработка половых органов, при необходимости вход в вагину закрывается ватным тампоном. При анализе мочи берется ее средняя порция, помещаемая затем в стерильную баночку. Моча должна быть обработана в течение 2-х часов после забора и храниться при температуре не выше 20°С.

Правила проведения бакпосева на микрофлору у мужчин

В качестве материала для исследования может использоваться эякулят (сперма), кровь, моча, секрет простаты. Для получения максимально точного результата мужчинам следует придерживаться таких требований перед сдачей анализа:

• воздержаться от сексуальных контактов за 1-2 перед тестированием на бакпосев;
• исключить прием антибиотиков за 3-4 недели до сдачи анализа;
• не мочиться за 4-5 часов до взятия пробы;
• тщательно вымыть половые органы и сменить нижнее белье.

О любых изменениях в самочувствии следует незамедлительно сообщать врачу во избежание получения некорректных результатов анализа.

Бакпосев при беременности

Любая бактериальная инфекция, «дремлющая» в организме женщины, может отрицательно повлиять на течение беременности, привести к заражению плода, а в некоторых случаях даже спровоцировать выкидыш на ранних сроках. Чтобы обезопасить себя и будущего ребенка от различных патологий, необходимо осознанно подходить к планированию зачатия и при необходимости проводить соответствующую антибактериальную терапию.

Среди показаний для проведения бакпосева выделяют следующие:

• наличие воспалительных заболеваний половых органов и мочеполовой системы;
• выявление причин невынашиввания при предварительном диагнозе — бесплодие;
• диагностика воспаления предстательной железы (у мужчин);
• подготовительные действия к зачатию ребенка;
• выбор правильной схемы лечения при наличии мочеполовых инфекций;
• частая смена половых партнеров и пренебрежение механической контрацепцией (презерватив);
• внематочная беременность (наступившая или присутствовавшая в прошлом).

Серьезную опасность для здоровья женщины, особенно в период беременности, представляет заболевание уреаплазмозом. Поскольку чаще всего оно протекает бессимптомно, вызывая впоследствии ряд серьезных осложнений (эндометрит, воспаление матки и т. д.), то своевременное диагностирование инфекции помогает провести необходимую терапию и снизить риск инфицирования ребенка в процессе вынашивания и родов.

Сроки готовности

Сроки готовности анализа зависят от вида исследуемого материала и могут варьироваться от 3 до 14 дней. При взятии мазка из урогенитального тракта продолжительность теста занимает в среднем 7 дней. Посевы на микрофлору (у мужчин и женщин) длятся 5-8 дней. Предварительный результат можно получить не ранее 3-х дней поле сдачи мазка.

При относительной длительности и специфики проведения бактериологического посева на сегодняшний день данный вид лабораторного исследования является одним из самых точных и эффективных способов диагностики, позволяющий не только определить тип болезнетворных организмов, но и спланировать схему борьбы с выявленным заболеванием.

Бактериологический посев — один из видов лабораторного исследования, основанный на анализе биологического материала посредством его высева на специальные питательные среды. По результатам бакпосева выявляется наличие/отсутствие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов определенного типа с целью дальнейшего изучения их физико-химических свойств и определения схемы лечения диагностированных инфекционных заболеваний.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, уреа- микоплазмы медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают бактериальный вагиноз (гарднереллез);
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов, которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями сифилиса – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов, которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

• Первым пунктом заключения, как правило, стоит название возбудителя на латинском языке, например, Escherichiacoli. Это – кишечная палочка, она является естественным обитателем кишечника и в допустимых количествах никакого вреда не приносит;
• Следующий пункт – концентрация микроорганизма. Е.coli– обильный рост (1х10^ 6 и более) норма – менее 1x10^ 4 ;
• Далее – патогенность: флора условно-патогенная.

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или мазок из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
  • дифтероидами;
  • стафилококками;
  • некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала, перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку, окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14, поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный грибок рода Candida (обычно это Candida albicans), трихомонады и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой гонореей и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает хламидийная инфекция, приносящая большой вред не только при беременности. Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

• Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
• Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
• Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1 : 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном. Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

• Общие сведения об анализе
• Показания и исследуемые пробы
• Методы изучения материалов
• Дисковый способ
• E-тест
• Методы разведения
• Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)
• Расшифровка результатов
• Расшифровка по типу возбудителя
• Устойчивые
• Условно-чувствительные
• Чувствительные

Общие сведения об анализе

Анализ на чувствительность к антибиотикам – лабораторный тест, который определяет тип возбудителя, общий объем патогенных сред. Перед тем, как сдавать анализ, требуется подготовиться. Обычно исследование назначают на утро. Пациентам не рекомендуется подмываться, промывать носовые ходы, умываться. Нельзя принимать антибиотики из-за риска получения ложных результатов. О том, как сдавать анализ правильно, расскажет лечащий врач.

Анализ на чувствительность к антибиотикам показан для изучения типа бактерий, определения медикаментозной терапии.

Основная цель заключается в определении типа бактерии, ее устойчивости или чувствительности к различным группам антибиотиков.

Показания и исследуемые пробы

Основными показаниями к назначению анализа являются острые воспалительные процессы бактериальной природы и составление плана дальнейшего ведения пациента. Анализ применяется в хирургии, урологии, нефрологии, онкологии других отраслях медицины.

Исследуемый биологический материал зависит от текущего клинического анамнеза пациента, локализации воспалительного очага. При обширном сепсисе рекомендуется развернутое изучение всех биологических материалов. Для исследования подходят:

• Кровь. Биохимический развернутый гемотест помогает определить не только тип возбудителя, но и общее состояние организма в целом.
• Урина. Бакпосев мочи проводится для уточнения половых инфекций, воспаления почек, органов урогенитальных путей.
• Анализ кала. Применяется в отношении пациентов с воспалением кишечного тракта, осложнениями острых кишечных инфекций, подозрением на паразитарные инфекции. Одновременно изучают физические и химические параметры каловых масс.
• Мазок из цервикального канала у женщин. Метод исследования помогает определить инфекции половых путей.
• Исследование спермы, мазок из уретры, секрет простаты. Анализы на бактериальный посев применяются для уточнения инфекций различной локализации у мужчин.
• Анализ мокроты. Помогает в диагностике дыхательных заболеваний, туберкулеза легких, пневмонии. Одновременно оценивают количество примесей — гноя, крови, слизи.

При хронических патологиях респираторного тракта и дыхательной системы возможно проведение забора мазка из носовых ходов, гортани. Анализ широко распространен в педиатрии ввиду легкости забора биологического материала.

Методы изучения материалов

Бакпосев выполняется несколькими способами, среди которых диско-диффузионный метод, Е-тест, метод разведения. В каждом случае выполняется определенный тип теста.

Дисковый способ

Распространенный и простой способ определения типа бактериальной микрофлоры. Исследуемый материал размещают в чаше Петри по всей поверхности, помещают небольшие картонные диски, смоченные в определенном виде антибиотика. После чашу плотно закрывают и устанавливают в термостат при температуре человеческого тела на 12 часов.

Бакпосев мочи назначается при подозрении на инфекции мочеполовых путей и урогенитального тракта

Под воздействием диффузных процессов антибактериального препарата формируется зона подавления патогенной микрофлоры. По окончанию анализа производят замер диаметра выявленной зоны подавления.

E-тест

Способ бакпосева похож на диско-диффузный, однако, вместо картонных дисков в чашу помещают специальную шкалу-полоску с различной интенсивностью пропитки антибиотиком. Посев инкубируют около 12 часов, после чего оценивают эффективность каждой пропитанной зоны полоски. Выбор антибиотика по результату теста зависит от выраженности зоны подавления на определенном участке полоски. Е-тест простой и доступный метод тестирования, но отличается высокой стоимостью.

Методы разведения

Анализ основан на последовательном двойном разведении антибиотика от максимальной к минимальной концентрации. 1 мл биоматериала разбавляют 10 раз в 10 пробирках с питательной средой. В той пробирке, где прекращается рост патогенной микрофлоры, обозначают максимальной границей количества патогенов в пробе. Этот же метод применяется для выявления чувствительности к антибиотикам.

Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)

Минимальная бактерицидная концентрация — наименьшая концентрация антибактериального вещества, которая уничтожает патогенные бактерии на 100%. Показатель МБК учитывают и в лечении тех пациентов, у которых отсутствует эффективность от ранее назначенной этиотропной терапии. Анализ на флору и МБК особенно применяют на фоне остеомиелита, генерализованного сепсиса или воспаления, бактериального миокардита, эндокардита.

Современные лаборатории оснащены необходимым оборудованием для определения типа и чувствительности бактерий. Получение результатов занимает 1-2 суток, что зависит от транспорта полученного материала и вида исследования.

Расшифровка результатов

Для определения чувствительности антибиотика оценивают зоны подавления роста колоний патогенных штаммов. Категории резистентности непостоянны, поэтому регулярно пересматриваются из-за изменения чувствительности к антибактериальным препаратам.

Анализ на флору постоянно применяется в различных медицинских сферах

Мутация патогенов вызвана и беспорядочным применением антибиотика без дополнительных исследований. Клиницисты выделяют несколько видов интерпретаций:

• клинический;
• микробиологический.

Оценка клинического метода основана на эффективности действия того или иного препарата. Микробиологическая интерпретация основана на распределении концентрации антибиотика и степени подавления патогенной активности в каждой концентрации. Благодаря микробиологической интерпретации подбирается доза препарата для достижения высоких терапевтических результатов.

Расшифровка по типу возбудителя

Проведение анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо и при неясной природе воспалительного процесса. Учитывая, что после приема антибактериальных препаратов, патогенные штаммы могут мутировать, изменять состояние, то микроорганизмы классифицируют на устойчивые, чувствительные, условно-чувствительные.

Устойчивые

Устойчивые или резистентные бактерии характеризуются дальнейшим ростом и патогенной активностью даже на фоне приема максимальных доз препарата. В этом случае требуется длительное лечение, назначение комбинированных антибиотиков с различными концентрациями.

Условно-чувствительные

Условно-чувствительные или промежуточно-резистентные бактерии провоцируют различный терапевтический исход. Лечебный эффект достигается, благодаря повышению суточной дозы препарата, постоянной коррекции концентрации антибиотика.

В отдельных случаях резистентные и промежуточно-чувствительные бактерии объединяются в одну группу устойчивых штаммов. Лечение в таком случае носит эмпирический характер. Назначение минимальные дозы с их постепенным повышением. К таким возбудителям относятся хламидии, уреаплазма, микоплазма.

Чувствительные

Чувствительность бактерий к антибиотику характеризуется быстрым подавлением патогенной активности под воздействием минимальных или стандартных возрастных доз препарата. Для выздоровления достаточно одного медикаментозного курса.

Исходя из этой классификации, назначение антибиотиков не оправдано только на основании предъявляемых жалоб и клинической картины. Именно поэтому показано проведение бакпосева.

Полученные результаты исследования на бакпосев имеют клиническую значимость только на момент острого периода воспалительного процесса. Таким образом, при рецидиве инфекции через определенное время картина может значительно измениться, а назначенный ранее антибиотик станет неэффективным. При каждом обострении хронической инфекции показано проведение нового анализа.

Анализ основан на последовательном двойном разведении антибиотика от максимальной к минимальной концентрации. 1 мл биоматериала разбавляют 10 раз в 10 пробирках с питательной средой. В той пробирке, где прекращается рост патогенной микрофлоры, обозначают максимальной границей количества патогенов в пробе. Этот же метод применяется для выявления чувствительности к антибиотикам.

Мазок на флору у женщин – лабораторное исследование, определяющее виды бактерий, которые присутствуют во влагалище. Это самый распространенный и простой метод выявления воспалений и ЗППП (заболеваний, передающихся половым путем).

Цель исследования

• определить состояние микрофлоры влагалища;
• выявить половые инфекции и их возбудителя;
• определить степень воспалительного процесса;
• оценить степень чистоты влагалища, что обязательно перед дальнейшими диагностическими исследованиями и гинекологическими операциями – прижиганием эрозий, удалением полипов, выскабливанием;
• оценить состояние здоровья беременных женщин.

Когда гинеколог берет мазок на флору?

• жалобы на зуд или выделения из влагалища, другие симптомы воспаления;
• профилактические осмотры;
• контроль проведенного лечения;
• прием гормональных препаратов и иммуносупрессоров;
• контроль микрофлоры на фоне длительного приема антибиотиков;
• беременность. Проводится 3 раза за беременность (при постановке на учет, на 30-ой и 36-ой неделе).

Данное исследование имеет множество названий: мазок на флору, общий мазок, бактериоскопия, мазок на чистоту. Существуют также мазки на флору из мочеиспускательного канала и канала шейки матки. Обычно эти три вида мазка проводят совместно.

Нормальная микрофлора влагалища

Влагалище здоровой женщины не стерильно. В нем присутствует множество видов микроорганизмов, их совокупность и называется микрофлорой. Бактерии постоянно конкурируют между собой за места обитания на стенках влагалища и за продукты питания.

Наиболее многочисленными являются лактобактерии и бифидобактерии, которые прикрепляются к эпителию влагалища. Они вырабатывают спирты, перекись, молочную и другие кислоты, обеспечивающие кислую реакцию влагалищного секрета. А также лизоцим и другие ферменты, сдерживающие размножение других видов бактерий.

Микроорганизмы, входящие в состав микрофлоры здоровой женщины

Микроорганизмы	Количество КОЕ/мл
Лактобактерии или палочки Додерлейна Lactobacillus spp	10 7 -10 9
Бифидобактерии Bifidobacterium spp.	10 3 -10 7
Клостридии Clostridium spp.	До 10 4
Пропионибактерии Propionibacterium spp.	До 10 4
Мобилункус Mobiluncus spp.	До 10 4
Пептострептококки Peptostreptococcus spp	10 3 -10 4
Коринебактерии Corynebacterium spp.	10 4 -10 5
Стафилококки Staphylococcus spp.	10 3 -10 4
Стрептококки Streptococcus spp.	10 4 -10 5
Энтеробактерии Enterobacteriaceae	10 3 -10 4
Бактероиды Bacteroides spp.	10 3 -10 4
Превотеллы Prevotella spp.	До 10 4
Порфиромонады Porphyromonas spp.	До 10 3
Фузобактерии Fusobacterium spp.	До 10 3
Вейлонеллы Veilonella spp.	До 10 3
Микоплазмы M.hominis	До 10 3
Уреаплазмы U.urealyticum	10 3
Кандиды — дрожжеподобные грибы	10 4

Аббревиатура КОЕ/мл означает – колониеобразующих единиц в 1 мл питательной среды. Каждая колониеобразующая единица – это микроорганизм, из которого может образоваться колония.

Число бактерий выражают в десятичных логарифмах, для того, чтобы не писать числа с большим количеством нолей.

В описании влагалищной микрофлоры часто можно встретить названия грамположительные или грамотрицательные бактерии. Эти термины означают, что первые бактерии окрашиваются по методу, разработанному микробиологом Граммом, а другие при этом не изменяют свою окраску.

Грамположительные палочки в мазке, к которым относятся лактобактерии, являются хорошим признаком. В норме они преобладают у женщин репродуктивного возраста. В период менопаузы (климакса) и постменопаузы на первое место выходят грамотрицательные бактерии.

В зависимости от потребности в кислороде бактерии разделяют на

• аэробные – те, что развиваются при наличии кислорода;
• анаэробные – для жизнедеятельности которых не нужен кислород.

Во влагалище здоровой женщины большинство бактерий анаэробы 10 8 –10 9

Как делают мазок на микрофлору влагалища?

Процедура включает несколько этапов.

• Женщина размещается в гинекологическом кресле.
• Введение стерильных гинекологических зеркал для получения доступа к стенкам влагалища и шейке матки.
• Сбор материала с задней стенки влагалища. Эта процедура абсолютно безболезненна. Неприятные ощущения могут возникнуть льшь при прикосновении шпателя к воспаленному участку.
• Нанесение материала на предметное стекло. Влагалищный секрет распределяют штриховыми движениями по обезжиренному стеклу максимально тонким слоем, чтобы клетки располагались в один ряд и не закрывали друг друга.
• Фиксация мазка необходима, если его доставят в лабораторию более чем через 3 часа. Обработка позволяет избежать деформации клеток при высыхании и дает возможность сохранить препарат.
• Окраска мазка по методу Грама. В качестве красителя используется метиленовый синий. После окрашивания легче установить вид бактерий и определить состав микрофлоры.
• Оценка результата, которая состоит из 3-х частей: подсчет лейкоцитов, видовой состав микрофлоры, оценка чистоты влагалища.

Зачастую мазок берут сразу из трех точек:

• отверстия мочеиспускательного канала и парауретральных ходов (узких каналов, расположенных параллельно уретре);
• стенок влагалища;
• канала шейки матки.

Анатомическая близость этих участков приводит к тому, что инфекции и воспаления протекают взаимосвязано. Для каждого участка используется отдельный стерильный шпатель, щеточку или ватный тампон. Взятый материал наносят на 3 стерильных предметных стекла, отдельно для каждого участка.
Мазок на флору из влагалища абсолютно безвредная процедура, которая разрешена, в том числе и беременным женщинам. Во время забора материала слизистая не травмируется, поэтому после процедуры нет никаких ограничений. Разрешается принимать ванну, плавать, вступать в половые контакты и т.д.

Как подготовиться к этому мазку?

Что показывает мазок на микрофлору влагалища?

4 степени чистоты влагалища

Степень	Выявленные изменения	О чем говорит
I	Среда кислая. Лейкоциты – до 10. Эпителиальные клетки – 5-10. Большинство микроорганизмов – лактобактерии (палочки Дедерлейна). Другие бактерии – единично. Слизь – небольшое количество.	Идеальное состояние микрофлоры влагалища. Крайне редко встречается у женщин детородного возраста, живущих половой жизнью.
II	Среда слабокислая. Лейкоциты – до 10. Эпителиальные клетки 5-10. Большинсто – палочки Дедерлейна. Грамположительные кокки в небольшом количестве. Слизь в небольшом количестве.	Нормальное состояние. Встречается у большинства здоровых женщин.
III	Среда нейтральная. Лейкоциты – свыше 10. Эпителиальные клетки – свыше 10. Микроорганизмы в умеренном или большом количестве. Присутствуют грамотрицательные и грамотрицательные палочки и кокки. Единичные палочки Дедерлейна. Присутствуют «ключевые» клетки. Слизь – умеренное количество.	Воспаление влагалища – кольпит. Могут возникнуть симптомы: кремообразные выделения из влагалища, зуд, жжение, дискомфорт во время полового акта. У некоторых женщин это состояние протекает бессимптомно.
IV	Среда нейтральная или щелочная, рН свыше 4,5. Лейкоциты – свыше 30-ти или все поле зрения. Эпителиальные клетки – в большом количестве. Микроорганизмы в массивном количестве. Микрофлора представлена различными условно-патогенными и болезнетворными микроорганизмами. Палочки Дедерлейна могут отсутствовать. Слизь в большом количестве.	Выраженный воспалительный процесс. Симптомы: обильные выделения из влагалища (белые, желтоватые, зеленоватые), часто с неприятным запахом. Зуд, жжение, сухость, дискомфорт. Неприятные ощущения, боль при половом акте.

Какова норма мазка на микрофлору влагалища?

О чем говорят лейкоциты в мазке на флору влагалища?

Зачем производят чувствительность к антибиотикам при исследовании мазка?

Чувствительность к антибиотикам или антибиотикограмма – выяснение чувствительности бактерий к антибиотикам. Исследование проводят одновременно с посевом мазка при обнаружении во влагалище болезнетворных бактерий, вызывающих воспаление или половые инфекции.

Существует большое количество антибиотиков, но не все они одинаково эффективны по отношению к разным группам бактерий (на вирусы антибиотики не влияют). Случается, что после курса антибиотиков пациентка не выздоровела или болезнь вернулась через несколько дней/недель. Это произошло, потому что для лечения были назначены антибиотики, слабо влияющие на возбудителя болезни.
Для того чтобы лечение было максимально эффективным необходимо определить, какие антибиотики:

• полностью уничтожают бактерию — возбудителя болезни;
• останавливают рост возбудителя;
• не влияют на жизнедеятельность данной бактерии.

На основе проведенного исследования составляется антибиотикограмма. Это перечень антибиотиков, к которым чувствительны бактерии.

Как происходит исследование на чувствительность к антибиотикам?

После того, как были определены бактерии, вызвавшие болезнь, их распределяют в несколько пробирок с питательными средами. В каждую пробирку добавляют определенный антибиотик. Пробирки помещают в термостат, где созданы оптимальные условия для их размножения.

После культивации (около 7 дней) анализируют рост бактерий в пробирках. Там, где бактерии чувствительны к антибиотику, колоний не образуется. Этот препарат оптимальный для лечения пациентки. В пробирку, где добавлены препараты, к которым антибиотики нечувствительны, рост бактерий самый интенсивный. Такие лекарственные средства не могут быть использованы для лечения данного заболевания.

Что такое посев мазка?

Посев мазка или бактериологический посев (бакпосев) мазка – это лабораторное исследование, при котором содержимое влагалища помещают в питательную среду и создают оптимальные условия для роста бактерий.

Цели исследования:

• определить возбудителя инфекции половых органов;
• установить степень обсемененности – количество бактерий во влагалище;
• контролировать состояние микрофлоры после длительного лечения антибиотиками, цитостатическими препаратами. Проводится через 7-10 дней после отмены препарата.

В каком случае назначают посев мазка?

• всем беременным женщинам при постановке на учет;
• при воспалительных процессах в половых органах;
• в мазке обнаружены грамотрицательные диплококки – для подтверждения гонококковой инфекции (гонореи);
• при вульвовагините рецидивирующем или хроническом.

Как проводится микробиологическое исследование?

Отделяемое влагалища помещают в питательные среды – растворы или желеобразные массы, в которых имеются питательные вещества для бактерий. Пробирки и чашки Петри на 3-5 дней помещают в термостат, где постоянно поддерживается температура около 37 градусов, оптимальная для размножения микроорганизмов.

После культивации лаборант оценивает результаты. Из каждого микроорганизма в процессе деления вырастает целая колония бактерий. По ее внешнему виду лаборант определяет вид возбудителя. А по количеству колоний можно судить о концентрации данных микроорганизмов во влагалище. Далее концентрацию сравнивают с нормальными показателями.
Значимыми считаются те бактерии, концентрация которых превышает 10 4 КОЭ/мл. При данной концентрации микроорганизмы способны вызвать заболевание. При обнаружении такого количества бактерий результат анализа считается положительным.

В заключении, выдаваемом лабораторией, указывается:

• вид микроорганизма, который преобладает в мазке;
• патогенность микроорганизма – способность вызывать заболевание:

• Патогенный – присутствие которого может быть вызвано только болезнью.
• Условно-патогенный – бактерии, которые вызывают болезнь только при снижении иммунитета, при значительном увеличении их численности.

• концентрация микроорганизма во влагалище. В числовом показателе и в виде словесной характеристики: «скудно», «умеренный рост», «обильный рост».

В лабораторном заключении количество и рост бактерий может характеризироваться степенью:

Влагалище здоровой женщины не стерильно. В нем присутствует множество видов микроорганизмов, их совокупность и называется микрофлорой. Бактерии постоянно конкурируют между собой за места обитания на стенках влагалища и за продукты питания.

Здравствуйте! Мне врач назначил сдать мазок на посев с определение чувствительности к антибиотикам. Сегодня забрала результаты, а там написано только “рост микрофлоры не обнаружен” — что это значит? Понимать это как “все плохо”, “все хорошо” или вообще нужно пересдать? На повторный прием только в понедельник, буду ломать голову все выходные 🙁

Все просто — значит ничего лишнего у вас не найдено, и все в порядке вещей, так что вам в пору радоваться, а не переживать…

Очень хороший анализ. Означает что у вас нет гардинел, грибков и всевозможных половых бактерий. Вы абсолютно чисты . Поводов для переживаний нет. Когда пишут что то плохое всегда бывает понятно, без дополнительных разъяснений.

Значит бактерии любого рода отсутствуют и вам не о чем беспокоиться. Если бы что-то было. Были бы совсем другие слова, которые вы сразу бы правильно поняли. А так все у вас отлично.

Ваш мазок в норме и повода для беспокойства нет. Дело в том, что в организме женщины постоянно присутствуют различные бактерии. С помощью анализа проверяют находятся ли эти бактерии, грибки в пределах нормы. Если у Вас нормальное соотношение, то и женщина не ощущает никакого дискомфорта. Если же количество каких-либо грибков или бактерий существенно увеличивается, т.е. наблюдается рост патогенной микрофлоры, то и женщина это сразу ощущает. У вас все отлично, не переживайте.

У вас хороший мазок. У меня как-то гардинеллы росли, пришлось лечить. А у вас все в норме, все бактерии и грибки мирно сосуществуют. Их количество в пределах нормы. Опасно, когда те или другие расти начинают, тогда надо бить тревогу и лечиться.

Анита, повода для переживаний у Вас нет. Это если бы был выявлен рост чего-либо, определяется к какому антибиотику он чувствителен, а если ничего не выявлено, то и лечить антибиотиками нечего. А значит все хорошо!

Все просто — значит ничего лишнего у вас не найдено, и все в порядке вещей, так что вам в пору радоваться, а не переживать…

http://myvenerolog.com/analizy-i-diagnostika/bakteriologicheskij-posev-chto-etot-takoe-kak-provoditsya-rasshifrovka.htmlhttp://izppp.ru/analizy/bak-posev/http://www.baby.ru/wiki/analiz-na-cuvstvitel-nost-k-antibiotikam-tipy-issledovanij-polucennye-rezul-taty-i-rassifrovka/http://www.polismed.com/articles-mazok-na-floru-u-zhenshhin-mazok-so-slizistojj-vlagalishha-na-chistotu-rasshifrovka-rezul-tatov-kak-podgotovit-sja-zachem-proizvodjat-normal-nye-pokazateli-mikroflory-vlagalishha.htmlhttp://mama66.ru/answers/zdorovie/chto-znachit-v-rezultatakh-mazka-rost-mikroflory-ne-obnaruzhen

Давайте вместе будем делать материал еще популярнее, и после его прочтения сделаем репост в удобную для Вас социальную сеть.